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中国应用生理学杂志 ›› 2017, Vol. 33 ›› Issue (1): 65-68.doi: 10.12047/j.cjap.5448.2017.016

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PC12细胞在缺氧条件下的自噬现象

胡中慧1,2, 马慧萍1, 樊鹏程1, 李加恒2, 王俊丽2, 蒙萍1, 贾正平1   

  1. 1. 兰州军区兰州总医院药剂科, 甘肃 兰州 730050;
    2. 兰州军区联勤部药品仪器检验所, 甘肃 兰州 730050
  • 收稿日期:2015-06-08 修回日期:2016-05-10 出版日期:2017-01-28 发布日期:2018-06-19
  • 通讯作者: 马慧萍,Tel:13893616926,E-mail:mahuipingcxr@aliyun.com E-mail:mahuipingcxr@aliyun.com
  • 基金资助:
    马慧萍,Tel:13893616926,E-mail:mahuipingcxr@aliyun.com

  • Received:2015-06-08 Revised:2016-05-10 Online:2017-01-28 Published:2018-06-19
  • Contact: 马慧萍,Tel:13893616926,E-mail:mahuipingcxr@aliyun.com E-mail:mahuipingcxr@aliyun.com
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    马慧萍,Tel:13893616926,E-mail:mahuipingcxr@aliyun.com

摘要: 目的:考察PC12细胞内自噬发生与缺氧时间的关系,探讨自噬对缺氧细胞的影响作用。方法:以PC12细胞为模型,将对数生长期的细胞加入96孔培养板,37℃、5% CO2培养24 h后,放入0.5% O2、94.5% N2和5% CO2的培养箱缺氧1 h、3 h、6 h、9h、12 h、24 h、36 h和48 h,用MTT法检测细胞存活率,透射电镜观察细胞内自噬体,Westen blot法检测自噬相关蛋白(LC3B、Atg5和Beclin1)的表达,用试剂盒检测细胞内乳酸脱氢酶(LDH)活性、活性氧自由基(ROS)和线粒体膜电位(MNP)水平,探究缺氧不同时间自噬对PC12细胞的作用。结果:在缺氧3~12 h,PC12细胞自噬明显增加,自噬相关蛋白(LC3B、Atg5和Beclin1)表达增加,尤其是缺氧9 h,PC12细胞存活明显增加,表明短时间缺氧自噬对细胞起保护作用,而随着缺氧时间的延长细胞存活明显降低,自噬相关蛋白表达水平减少,细胞LHD和ROS水平明显增加。MMP水平显著下降,细胞凋亡明显增加。结论:在缺氧早期自噬对PC12细胞起保护作用,但缺氧时间较长,超过了细胞自身调节能力导致细胞死亡。

关键词: 自噬, PC12细胞, 缺氧, 自噬相关基因

Key words: autophagy, PC12 cells, Hypoxia, autophagy-related genes (Atg)

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