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中国应用生理学杂志 ›› 2020, Vol. 36 ›› Issue (2): 148-151.doi: 10.12047/j.cjap.5864.2020.033

• 研究简报 • 上一篇    下一篇

miRNA-95靶向FOXD1基因对结直肠癌LoVo细胞放射敏感性的影响及其机制*

梁宛伶1, 肖天保1△, 袁峰2, 曹一波1, 颜登国3   

  1. 1.贵州中医药大学第一附属医院肛肠外科, 贵阳 550001;
    2.四川省自贡市第一人民医院核医学科, 自贡 643000;
    3.贵州医科大学附属医院肛肠外科, 贵阳 550001
  • 出版日期:2020-03-28 发布日期:2020-07-31
  • 通讯作者: Tel: 18808229515; E-mail: xiaohe_sipeng@163.com

Effects of microRNA95 targeting FOXD1 gene on radiosensitivity of colorectal cancer loVo cells and its mechanism

LIANG Wan-ling, XIAO Tian-bao, YUAN Feng, CAO Yi-bo, YAN Deng-guo   

  • Online:2020-03-28 Published:2020-07-31

摘要: 目的: 探讨miRNA-95靶向FOXD1基因对结直肠癌loVo细胞放射敏感性的影响及其机制。方法: 结直肠癌LoVo细胞购自武汉普诺赛生命科技有限公司,将LoVo细胞分为三组接种于6孔板中,每组3个复孔,实验重复3次,C组(对照组正常LoVo细胞),M组(miRNA-95-mimics转染LoVo细胞),I组(miRNA-95-inhibitions转染LoVo细胞),利用直线加速器6 MV/8 Gy的X射线垂直照射细胞,剂量率3 Gy/min,持续照射12 h后收集细胞。采用RT-PCR法检测LoVo细胞中FOXD1的表达情况,流式细胞术检测LoVo细胞凋亡情况,Western blot检测细胞中FOXD1蛋白的水平,细胞克隆测定细胞存活率,裸鼠成瘤实验取转染未经X射线照射的C组、M组、I组LoVo细胞细胞悬液,各取0.2 ml分别接种于C组、M组、I组BALB/C-nu雄性裸鼠左下肢足部皮上1次,每组10只,注射2周后,各组选取5只裸鼠进行X射线照射,每天4 Gy 照射一次,连续照射15 d,其余小鼠不照射,处死裸鼠并取出肿瘤进行称重。结果: 与C组比对,M组FOXD1水平明显升高,I组FOXD1水平明显低于M组、C组(P<0.05);在同样8 Gy 照射后,与I组比对,C组和M组loVo细胞凋亡率显著下降(P<0.05);在8 Gy照射后,与I组比对,M组和C组loVo细胞单克隆存活率有上升趋势(P<0.05)。无照射条件下,与M组相比,C组和I组肿瘤体积减少(P均<0.05),与C组比较,I组肿瘤体积减少(P<0.05)。X射线照射15 d后,与无照射组各组裸鼠相比肿瘤体积显著减小(P均<0.05),与M组相比,C组和I组肿瘤体积减少(P<0.05)。结论: miRNA-95低表达可提高LoVo细胞的放射敏感性,促进细胞凋亡,其作用机制可能抑制FOXD1蛋白的活性有关。

关键词: miRNA-95, 放射敏感性, loVo细胞, 小鼠, X射线

Key words: miRNA-95, radiosensitivity, loVo cells, mouse (rat), X-ray

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