脂联素抑制t-BHP诱导的内皮细胞凋亡作用及其可能机制探讨

doi:10.13459/j.cnki.cjap.2016.06.012

中国应用生理学杂志 ›› 2016, Vol. 32 ›› Issue (6): 540-544.doi: 10.13459/j.cnki.cjap.2016.06.012

脂联素抑制t-BHP诱导的内皮细胞凋亡作用及其可能机制探讨

吴莉¹, 刘鲁豫¹, 官滨斌¹, 王林曦^1,2, 刘小莺², 陈闽¹, 陈洲³, 刘礼斌^1,4

1. 福建医科大学附属协和医院内分泌科福建省内分泌研究所, 福州 350001;
2. 福建医科大学附属协和医院附属协和医院老年病科, 福州 350001;
3. 福建医科大学附属协和医院药学院, 福州 350001;
4. 福建医科大学附属协和医院老年健康科学研究院, 福州 350001

出版日期:2016-11-28 发布日期:2018-06-19
通讯作者: 刘礼斌,Tel:86-591-83357896-8423;E-mail:libin.liu@hot-mail.com E-mail:libin.liu@hot-mail.com
基金资助:
福建省科技重点项目（2013Y0041）；福建省卫生厅青年课题（2009-2-24）；国家和福建省临床重点专科建设项目经费资助；福建省卫计委青年项目（2014-1-43）；福建医科大学苗圃基金（2014MP031）

The Effect of recombinant adiponectin on apoptosis induced by t-BHP in human umbilical vein endothelial cells

WU Li¹, LIU Lu-yu¹, GUAN Bin-bin¹, WANG Lin-xi^1,2, LIU Xiao-ying², CHEN Min¹, CHEN Zhou³, LIU Li-bin^1,4

1. Department of Endocrinology, Fujian Medical University Union Hospital, Fujian Institute of Endocrinology, Fujian Medical University, Fuzhou 350001, China;
2. Department of Geriatrics, Fujian Medical University Union Hospital, Fujian Medical University, Fuzhou 350001, China;
3. College of Pharmacy, Fujian Medical University, Fujian Medical University, Fuzhou 350001, China;
4. Institute of the Elderly Health Sciences, Fujian Medical University, Fuzhou 350001, China

Online:2016-11-28 Published:2018-06-19
Supported by:
福建省科技重点项目（2013Y0041）；福建省卫生厅青年课题（2009-2-24）；国家和福建省临床重点专科建设项目经费资助；福建省卫计委青年项目（2014-1-43）；福建医科大学苗圃基金（2014MP031）

摘要/Abstract

摘要： 目的：探讨重组脂联素对第三丁基过氧化氢（t-BHP）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）凋亡的影响及其相关的分子机制。方法：以HUVECs作为研究对象，给予t-BHP处理，模拟体外HUVECs氧化损伤细胞凋亡模型。在此基础上，用携带重组脂联素基因的腺病毒转染HUVECs，观察重组脂联素对t-BHP诱导的HUVECs凋亡的影响。用MTT法检测细胞增殖活力。Hochest/PI荧光染色检测细胞凋亡率。Western blot检测细胞凋亡相关蛋白p-JNK、JNK和Caspase 3表达水平的变化。结果：100 μmol/L的t-BHP作用8 h可诱导HUVECs发生凋亡。与对照组相比，t-BHP组p-JNK、active caspase 3表达增多（P<0.01）。HUVECs高表达重组脂联素基因后，可明显抑制t-BHP诱导的HUVECs凋亡（P<0.01），下调t-BHP诱导的p-JNK、active caspase 3表达。结论：持续t-BHP氧化损伤可诱导HUVECs发生凋亡。重组脂联素可有效抑制t-BHP诱导的HUVECs凋亡，其机制与p-JNK、active caspase 3的表达下调有关。

关键词: 重组脂联素, 第三丁基过氧化氢, 氧化应激, 细胞凋亡, 人脐静脉内皮细胞

Abstract: Objective: To investigate the protective effect and possible mechanism of recombinant adiponectin on apoptosis in Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVECs) induced by tert-butyl hydroperoxide (t-BHP). Methods: HUVECs were cultured in vitro and apoptosis was induced by t-BHP. On this basis, HUVECs were transfected with adenovirus carrying adiponectin prior to exposure to t-BHP, to further explore the protective effect of adiponectin on apoptosis induced by t-BHP. The percentage of cell viability was determined by MTT assay. The apoptotic rate was evaluated by fluorescence microsopic analysis with Hochest/PI staining. The protein levels of p-JNK, JNK and Caspase 3 were detected by Western blot. Results: Following t-BHP 100 μmol/L administration for 8 h, the ratio of apoptotic cells was increased. Western blot revealed that the protein levels of p-JNK and active caspase 3 were increased(P<0.01) compared to the control group. When cells were pretreated by adenovirus with adiponectin, the apoptosis rate and protein levels of p-JNK and active caspase 3 were decreased significantly(P<0.01). Conclusion: Continuous exposure to t-BHP induced apoptosis in HUVECs. Recombinant adiponectin protected HUVECs from apoptosis induced by t-BHP, which was correlated with the downregulation of p-JNK and active Caspase 3.

Key words: recombinant adiponectin, tert-butylhydroperoxide, oxidative stress, apoptosis, human umbilical vein endothelial cells

中图分类号:

吴莉, 刘鲁豫, 官滨斌, 王林曦, 刘小莺, 陈闽, 陈洲, 刘礼斌. 脂联素抑制t-BHP诱导的内皮细胞凋亡作用及其可能机制探讨[J]. 中国应用生理学杂志, 2016, 32(6): 540-544.

WU Li, LIU Lu-yu, GUAN Bin-bin, WANG Lin-xi, LIU Xiao-ying, CHEN Min, CHEN Zhou, LIU Li-bin. The Effect of recombinant adiponectin on apoptosis induced by t-BHP in human umbilical vein endothelial cells[J]. CJAP, 2016, 32(6): 540-544.

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脂联素抑制t-BHP诱导的内皮细胞凋亡作用及其可能机制探讨

The Effect of recombinant adiponectin on apoptosis induced by t-BHP in human umbilical vein endothelial cells

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