中国应用生理学杂志 ›› 2018, Vol. 34 ›› Issue (4): 360-363.doi: 10.12047/j.cjap.5584.2018.082
HDAC4基因甲基化对hMSCs向汗腺样细胞诱导转分化的影响
赵换军1, 丁路1, 付潇潇1, 王慧英1, 张翠萍2
- 1. 首都医科大学附属北京潞河医院, 北京 101100;
2. 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室, 北京 100048
DNA methylation of HDAC4 gene affects the trans-differentiation process of hMSCs into sweat gland like cells
ZHAO Huan-jun1, DING Lu1, FU Xiao-xiao1, WANG Hui-ying1, ZHANG Cui-ping2
- 1. Department of Burn and Plastic Surgery, Beijing Luhe Hospital of the Capital Medical University, Beijing 101100;
2. Wound Healing and Cell Biology Laboratory, The First Affiliated Hospital of General Hospital of PLA, Beijing 100048, China
摘要： 目的：探讨在诱导人骨髓间充质干细胞（hMSCs）转分化为汗腺样细胞过程中，组蛋白去乙酰化酶4（HDAC4）甲基化的改变及其对诱导转分化过程的影响。方法：选取人骨髓间充质干细胞系体外培养、扩增后，取第三代hMSCs与热休克处理的汗腺细胞进行Transwell+诱导因子的共培养。收集诱导后实验组的汗腺样细胞和同期对照组的hMSCs，采用甲基化特异性PCR（MSP）和飞行质谱（Mass Array）法检测HDAC4基因启动子区CpG岛甲基化状态的变化，随后采用甲基化抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷（5-aza-CdR，10 μmol/L）处理实验组hMSCs，对照组为同期培养的hMSCs，RT-PCR测定两组细胞HDAC4基因和癌胚抗原（CEA）基因的mRNA表达量。结果：诱导前hMSCs中HDAC4基因整体甲基化水平较高，探针cg2463009处CpG位点甲基化程度为0.901，诱导转分化后汗腺样细胞中HDAC4基因整体甲基化水平下降37%，甲基化程度为0.531；探针cg14823429处CpG位点甲基化程度由诱导前的0.687下降到0.386。5-aza-CdR处理48 h后，实验组HDAC4基因mRNA表达水平上调，与诱导转分化相关的CEA mRNA同期表达量也增强，与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05）。结论：HDAC4基因的甲基化参与了hMSCs转分化为汗腺样细胞过程的调控。