在食管癌细胞增殖过程中蛋白酶激活受体-2(PAR-2)对细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的调控机制*

doi:10.12047/j.cjap.5815.2019.123

中国应用生理学杂志 ›› 2019, Vol. 35 ›› Issue (6): 559-562.doi: 10.12047/j.cjap.5815.2019.123

在食管癌细胞增殖过程中蛋白酶激活受体-2(PAR-2)对细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的调控机制^*

张其良¹, 曹文理², 邓全军^3△

1. 天津市第四中心医院消化内科, 天津 300140;
2. 天津市北辰医院呼吸内科, 天津 300400;
3. 武警特色医学中心, 天津 300162

收稿日期:2019-01-21 出版日期:2019-11-28 发布日期:2020-04-02
通讯作者: 武警后勤学院附属医院面上项目(FYM201531)

Regulatory mechanisms of PAR-2 on CyclinD1 in the proliferation of esophageal cancer cells

ZHANG Qi-liang, CAO Wen-li, DENG Quan-jun

Received:2019-01-21 Online:2019-11-28 Published:2020-04-02

摘要/Abstract

摘要： 目的:探讨在食管癌细胞增殖过程中蛋白酶激活受体-2(PAR-2)影响细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的机制。方法:方法:使用食管癌EC109细胞株,实验分为:空白对照组、PAR-2激动组(加入激动剂SLIGKV)、PAR-2反激动组(加入反激动剂VKGILS)、PAR-2 shRNA组(PAR-2shRNA成功转染)和MAPK抑制组(加入阻滞剂PD98059);取对数生长期的细胞,以6×10⁴cells/ml的密度接种于培养瓶中,置于孵育箱中培养24 h后使用PBS清洗3次,更换为无血清的1640培养基培养24 h,之后各实验组按实验设计分别加入所需试剂,每组设置3个复孔,于孵育箱中继续培养24 h,采用RT-PCR法检测PAR-2、ERK1、CyclinD1的mRNA的表达水平;采用Western blot法检测PAR-2、ERK1、p-ERK1、CyclinD1的蛋白表达水平。结果:与空白对照组相比,PAR-2激动组PAR-2mRNA、ERK1 mRNA、和CyclinD1 mRN表达明显升高(P＜0.05),PAR-2、p-ERK1和CyclinD1蛋白表达升高(P＜0.05);PAR-2 shRNA组PAR-2mRNA、ERK1 mRNA和CyclinD1 mRNA表达降低(P＜0.05),PAR-2、p-ERK1和CyclinD1蛋白表达降低(P＜0.05);MAPK抑制组ERK1 mRNA和CyclinD1 mRNA表达明显降低(P＜0.05),p-ERK1和CyclinD1表达降低(P＜0.05)。结论: PAR-2可通过MAPK通路调节CyclinD1的表达从而促进食管癌细胞EC109的增殖。

关键词: 食管癌EC109细胞株, 蛋白酶激活受体-2, 细胞外调节蛋白激酶1, 细胞周期蛋白D1, 增殖

Key words: esophageal cancer cell line EC109, PAR-2, ERK1, CyclinD1, proliferation

中图分类号:

R571

张其良, 曹文理, 邓全军. 在食管癌细胞增殖过程中蛋白酶激活受体-2(PAR-2)对细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的调控机制^*[J]. 中国应用生理学杂志, 2019, 35(6): 559-562.

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在食管癌细胞增殖过程中蛋白酶激活受体-2(PAR-2)对细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的调控机制^*

Regulatory mechanisms of PAR-2 on CyclinD1 in the proliferation of esophageal cancer cells

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