中国应用生理学杂志 ›› 2016, Vol. 32 ›› Issue (2): 102-105.doi: 10.13459/j.cnki.cjap.2016.02.002
冷应激条件下猪睾丸细胞中RNA结合基序蛋白3过表达对Caspase 3表达的影响
李云龙1, 李俭2, 李昌盛2, 李静辉2, 孟宇2, 杨焕民2, 李士泽1,2
- 1. 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院, 大庆 163319;
2. 黑龙江八一农垦大学动物科技学院, 大庆 163319
Effect of RNA binding motif protein 3 overexpression on Caspase 3 expression in swine testiclar cell under cold exposure
LI Yun-long1, LI Jian2, LI Chang-sheng2, LI Jing-hui2, MENG Yu2, YANG Huan-min2, LI Shi-ze1,2
- 1. College of Life Science and Technology, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing 163319, China;
2. College of Animal Science and Veterinary Medicine, Heilongjiang Bayi Agricultural University, Daqing 163319, China
摘要： 目的：探讨冷应激（32℃）条件下，猪睾丸（ST）细胞系中RNA结合基序蛋白3（RBM3）过表达时凋亡蛋白半胱天冬酶3（Caspase 3）表达量变化情况。方法：利用本实验室成功构建的携带绿色荧光蛋白（GFP）的RBM3过表达慢病毒载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-RBM3和空病毒载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-DEST分别感染ST细胞，作为过表达病毒（OEV）组和空载体病毒（EVV）组，此外还设立野生型细胞（WTC）组作对照，利用实时荧光定量RCR（qPCR）法和Western blot分析法检测各组中RBM3 mRNA和蛋白的表达情况。然后对各组细胞进行37℃以及32℃（2 h、4 h，8 h）的冷应激处理，利用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测各组Caspase 3表达量的变化。结果：OEV组RBM3基因和蛋白相对表达量高于EVV组和WTC组。在37℃以及32℃冷应激实验（2 h、4 h，8 h）中，OEV组Caspase 3表达量显著低于EVV组和WTC组。结论：冷应激ST细胞中RBM3过表达能够显著地降低Caspase 3的表达程度，为RBM3基因具有抵抗低温诱导ST细胞凋亡作用提供实验依据。