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中国应用生理学杂志 ›› 2022, Vol. 38 ›› Issue (6): 735-738.doi: 10.12047/j.cjap.6285.2022.134

• 研究简报 • 上一篇    下一篇

原代大鼠骨髓间充质干细胞的改良培养及鉴定*

马华根1, 刘海琴2, 唐元瑜3△   

  1. 1.北京中医药大学中医学院, 北京 102488;
    2.福建中医药大学中西医结合学院,
    3.福建中医药大学中医学院, 福州 350122
  • 收稿日期:2022-02-16 修回日期:2022-07-27 出版日期:2022-11-28 发布日期:2023-06-12
  • 通讯作者: Tel: 0591-22861152; E-mail: 2422198977@qq.com
  • 基金资助:
    *国家自然科学基金资助项目(81072714);福建省自然科学基金资助项目(2017J01545)

An improved method about culture and identification of primary rat bone marrow derived mesenchymal stem cells

MA Hua-gen, LIU Hai-qin, TANG Yuan-yu   

  • Received:2022-02-16 Revised:2022-07-27 Online:2022-11-28 Published:2023-06-12

摘要: 目的: 改良原代大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离培养方法。方法: 基于“干细胞生态位”原理,采用全骨髓贴壁法结合骨片消化法分离培养原代大鼠BMSCs。通过细胞形态学观察、细胞表面标志物CD分子检测以及定向诱导分化实验对目的细胞进行鉴定。结果: 所培养的细胞形态为细长梭形,其融合后呈典型的“涡旋状”紧密排列,且细胞增殖迅速,原代培养5~6 d即可达到融合状态,按1∶3比例连续传代到第8代时,细胞形态仍基本保持不变;第4代细胞的间充质干细胞表面标志物CD90、CD29、CD73以及造血干细胞表面标志物CD45、CD34、CD11b/c的阳性表达率分别为89.0%、98.3%、64.2%、3.5%、5.6%、 24.7%;定向诱导分化实验表明目的细胞具有良好的成脂、成骨分化潜能。结论: 本研究基于“干细胞生态位”原理,成功建立了一种高效稳定的原代大鼠BMSCs分离培养方法。

关键词: 骨髓间充质干细胞, 干细胞生态位, 改良培养, 免疫表型, 干细胞分化

Key words: bone marrow derived mesenchymal stem cells, stem cell niche, improved culture, immunophenotype, stem cell differentiation

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