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ISSN 1000-6834
CN 12-1339/R
创刊于 1985年 (双月刊)
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  • 中国应用生理学杂志
      2017年, 第33卷, 第5期 刊出日期:2017-09-28 上一期    下一期
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    研究论文
    双氢青蒿素对Raji细胞放射敏感性的影响
    张雷, 程龙球, 周兆, 吕林林, 刘革修
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 385-390.   DOI: 10.12047/j.cjap.5565.2017.093
    摘要   PDF (2415KB)
    目的:研究双氢青蒿素(DHA)对Raji细胞放射敏感性的影响并探讨其作用机制。方法:CCK8测定DHA对Raji细胞活力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡、胞内ROS及线粒体膜电位,Western blot检测AKT、p-AKT、Bcl-2、Bax和Cleaved-Caspase-3蛋白表达量。结果:实验分为对照组、DHA组(5 μmol/L DHA)、放射组(4 Gy γ射线)、联合放射组(5 μmol/L DHA和4 Gy γ射线),与其他3组相比,联合放射组Raji细胞的线粒体膜电位显著降低(P<0.01),胞内ROS含量和凋亡率显著升高(P<0.01);此外,Raji细胞AKT表达量与其他3组相比无明显差异,但AKT的磷酸化受到抑制;Bcl-2表达量显著降低,而Bax、Cleaved-Caspase-3表达量显著升高。结论:DHA可能通过抑制磷酸肌醇3-激酶(PI3K-AKT)信号通路及激活了Raji细胞的线粒体凋亡途径,引起氧化应激反应,从而增加Raji细胞对放射的敏感性。
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    JAK2/STAT3信号通路在运动预适应抗心肌细胞凋亡中的作用
    孙晓娟, 冯武龙, 侯娜
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 393-397.   DOI: 10.12047/j.cjap.5473.2017.095
    摘要   PDF (1485KB)
    目的:探讨Janus激酶2-信号转导子和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路在运动预适应(EP)抗心肌细胞凋亡中的作用及其机制。方法:健康雄性SD大鼠80只,随机分为对照组(C组)、力竭组(EE组)、运动预适应组(EP组)、运动预适应+AG490组(EP+AG组)(n=20)。连续3 d的间歇跑台运动建立EP动物模型,力竭运动致大鼠运动性心肌损伤。采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡改变、Western blot法检测心脏Caspase-3定量表达的变化,免疫组织化学法和Western blot法显示心脏p-JAK2和p-STAT3定位和定量表达的变化。结果:与C组相比,EE组心肌细胞凋亡、心脏Caspase-3、p-JAK2和p-STAT3的表达均显著升高;与EE组相比,EP组心肌细胞凋亡和心脏Caspase-3表达明显降低,而心脏p-JAK2和p-STAT3表达显著升高;与EP组相比,EP+AG组心肌细胞凋亡和心脏Caspase-3表达均显著升高,而心脏p-JAK2和p-STAT3表达明显降低。结论:EP可诱导心脏磷酸化JAK2和STAT3表达增加,减少心脏Caspase-3的表达,抑制心肌细胞凋亡,提示JAK2/STAT3信号通路参与了EP抗心肌细胞凋亡的作用。
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    慢性应激抑郁状态对大鼠外周神经内分泌因子生物节律的影响
    赵燕, 付玉
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 398-402.   DOI: 10.12047/j.cjap.5529.2017.096
    摘要   PDF (1056KB)
    目的:探讨慢性不可预见性应激状态下大鼠外周神经内分泌因子昼夜节律的表达特点。方法:成年雄性SD大鼠60只,随机分为模型组和对照组(n=30),采用束缚、摇晃、鼠笼倾斜、湿垫料、冷刺激、拥挤(整夜)、断食或断水、夹尾、昼/夜颠倒等慢性不可预知性温和刺激结合孤养方式,每天暴露于2种应激原中饲养21 d,建立抑郁症模型。测定应激前后大鼠糖水偏爱、旷场行为及高架十字迷宫行为学变化。连续24 h分6个时间点(ZT1、ZT5、ZT9、ZT13、ZT17、ZT21)处死动物取血,每个时间点处死5只大鼠。放免法测定6个时间点血清促肾上腺皮质激素(ACTH)含量,ELISA法测定6个相同时间点血浆皮质酮(CORT)、褪黑素(MT)、血管活性肠肽(VIP)含量,采用单一余弦法比较2组大鼠上述各指标的节律周期、振幅、峰值相位、中值的变化特点。结果:与对照组相比,模型大鼠体重增加值明显降低(P<0.01),各项行为学评分均显著减少(P<0.01)。慢性应激至抑郁样行为充分表达后,血浆ACTH、CORT的相位完全相反,时相大幅度提前,含量波动幅度减小,昼夜分泌节律紊乱;MT的24 h分泌节律完全丧失且整体水平下降,表达量显著降低;VIP虽仍存在24 h节律,但振幅明显降低,峰相位也延迟6 h,且表达量显著提高。结论:慢性应激抑郁状态可导致大鼠外周神经内分泌激素的近日节律非同步于SCN,表现为昼夜节律性和激素分泌量的异常。
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    脂联素改善阿尔茨海默病模型小鼠焦虑情绪及工作记忆
    曲雪松, 石辉, 曹秀丽, 董雪帆, 李甜, 焦娟娟, 祁金顺, 武美娜
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 405-409.   DOI: 10.12047/j.cjap.5498.2017.098
    摘要   PDF (920KB)
    目的:探讨脂联素(APN)预处理对9月龄三转基因阿尔茨海默病(3xTg-AD)模型小鼠学习记忆能力和焦虑情绪的影响。方法:选取9月龄3xTg-AD小鼠及C57BL/6J小鼠,分为4组:WT+Saline组、3xTg-AD+Saline组、WT+APN组和3xTg-AD+APN组,每组8只。将全部小鼠进行侧脑室埋管术后,恢复7 d,在自由清醒状态下分别经侧脑室给予生理盐水或APN,采用旷场、新物体识别及Y-迷宫3种行为学手段检测小鼠的情绪及学习记忆能力。结果:①在旷场实验中,与WT+Saline组小鼠相比,3xTg-AD+Saline组小鼠在中央区域的活动时间明显缩短,在外周区域的活动时间明显延长,给予APN后可有效逆转3xTg-AD小鼠的该现象,表明脂联素可有效缓解3xTg-AD小鼠的焦虑情绪。②新物体识别实验中,3xTg-AD+Saline组小鼠的辨别指数为(-16.7±10.1)%,明显低于WT+Saline组的(18.0±8.2)%(P<0.01)和3xTg-AD+APN组的(15.7±8.8)%(P<0.01),表明脂联素可明显改善3xTg-AD小鼠的识别记忆能力损伤。③Y-迷宫实验中,3xTg-AD+Saline组小鼠的自发交替正确率为(40.0±1.7)%,明显低于WT+Saline组的(56.6±4.6)%(P<0.01)和3xTg-AD+APN组的(53.9±5.6)%(P<0.01),表明脂联素能够逆转3xTg-AD小鼠工作记忆能力的损伤。结论:脂联素可以改善9月龄3xTg-AD小鼠的焦虑情绪及识别记忆和工作记忆能力损伤,可能在AD的预防和治疗中发挥有效作用。
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    甘草内生菌发酵物对痰浊阻肺大鼠炎症相关因子、水通道蛋白的影响
    杨志军, 邓毅, 曼琼, 王勇, 杨秀娟, 赵妮, 刘靓
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 410-414.   DOI: 10.12047/j.cjap.5495.2017.099
    摘要   PDF (1841KB)
    目的:筛选具有祛痰作用的甘草内生菌菌株发酵物。方法:Wistar大鼠90只,雌雄各半,随机分为9组(n=10):即空白组、模型组、阳性对照组、甘草水煎液组、甘草内生菌发酵物5组(JTZB005、JTZB006、JTZB043、JTZB060、JTZB063)。采用SO2烟薰30 min、低温兼冷风刺激10 min诱导痰浊阻肺大鼠模型,每天2次,连续10 d。造模10 d后,空白组、模型组给予生理盐水10 ml/kg灌胃,阳性组给予复方贝母氯化铵片0.08 g/kg灌胃,水煎液组给予甘草水煎液0.95 g/kg,内生菌各组给予甘草内生菌发酵液蒸干粉末0.95 g/kg,每天灌胃给药1次,连续7 d,观察大鼠一般情况。第7天,灌胃给药2 h后,断颈处死大鼠,取右肺上叶,4%戊二醛固定,HE染色切片,光镜下观察肺组织病理形态学变化,免疫组化染色切片,检测水通道蛋白1、5(AQP1、AQP5)的分布及表达。硝酸还原酶法测定肺组织一氧化氮(NO)含量,ELISA检测大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)的含量及环氧化酶-2(COX-2)的浓度。结果:与空白组比较,模型组大鼠肺组织中NO、TNF-α、ICAM-1的含量及COX-2的浓度显著升高,而水通道蛋白AQP1、AQP5的表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,水煎液组、JTZB005、JTZB006、JTZB063组肺组织NO、TNF-α、ICAM-1的含量及COX-2的浓度均显著降低,AQP1、AQP5的表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:筛选出JTZB005、JTZB006、JTZB063等3株具有祛痰作用的甘草内生菌有效菌株。
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    右美托咪啶对肺缺血/再灌注损伤大鼠促炎介质IL-1β、TNF-α水平的影响及其机制
    项冰倩, 何金波, 高慧, 罗梓垠, 戴雍月, 王万铁
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 415-419.   DOI: 10.12047/j.cjap.5526.2017.100
    摘要   PDF (1219KB)
    目的:评价右美托咪啶对大鼠肺缺血/再灌注损伤时促炎介质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的影响及机制。方法:雄性健康SPF级SD大鼠50只,体重250~310 g,8~12周龄,采用随机数字表法分为5组(n=10):假手术组(sham组)、缺血/再灌注损伤组(I/R组)、右美托咪啶组(Dex组)、阿替美唑组(Atip组)、右美托咪啶+阿替美唑组(Dex+Atip组)。采用大鼠在体左侧肺门夹闭30 min再灌注2 h制备缺血/再灌注(I/R)模型,Dex组、Atip组、Dex+Atip组分别在肺门阻断前30 min腹腔注射右美托咪啶(20 μg/kg)、阿替美唑(250 μg/kg)、右美托咪啶(20 μg/kg)和阿替美唑(250 μg/kg),其余处理同I/R组。实验结束后留取左肺检测肺湿干重比(W/D)和肺水含量(TLW);光、电镜观察肺组织形态结构变化;ELISA检测血浆中IL-1β及TNF-α的水平。结果:与sham组相比,其余各组W/D、TLW、IL-1β和TNF-α的水平明显升高(P<0.05,P<0.01),光、电镜均显示肺组织结构出现明显损伤性变化;与I/R组、Atip组、Dex+Atip组相比,Dex组W/D、TLW、IL-1β及TNF-α的含量下降(P<0.05,P<0.01),光、电镜下肺组织损伤减轻;I/R组、Atip组、Dex+Atip组两两比较,以上各指标均无统计学差异。结论:右美托咪啶通过降低促炎介质IL-1β、TNF-α浓度减轻大鼠肺缺血/再灌注损伤,其机制可能与激动α2-肾上腺素受体有关。
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    蒲公英多糖对溃疡性结肠炎大鼠IL-6/STAT3信号通路的影响
    王倩, 别玉龙, 王豆, 范文涛
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 422-425.   DOI: 10.12047/j.cjap.5525.2017.102
    摘要   PDF (1318KB)
    目的:观察蒲公英多糖对溃疡性结肠炎大鼠模型IL-6/STAT3信号通路的调控作用。方法:清洁级SD大鼠40只,雌雄各半,随机分为4组(n=10):空白组、模型组、阳性对照组、蒲公英多糖组。采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导结肠炎大鼠模型,阳性对照组采用美沙拉嗪10 mg/kg·d灌胃,蒲公英多糖组采用蒲公英多糖10 mg/kg·d灌胃,治疗4周后处死,观察大鼠结肠粘膜病理改变,检测大鼠血清白介素-6(IL-6)含量、结肠髓过氧化物酶(MPO)、白介素-6受体(sIL-6Rα)、糖蛋白130(gp130)、转录活化因子3(STAT3)、IL-6 mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清IL-6含量明显升高(P<0.01),MPO阳性密度明显增高(P<0.01),sIL-6Rα、gp130含量明显增高(P<0.01),肠组织STAT3、IL-6 mRNA相对表达量明显增高(P<0.01);与模型组比较蒲公英多糖组、美沙拉嗪组大鼠血清IL-6含量明显降低(P<0.01),MPO阳性密度明显降低(P<0.01),sIL-6Rα、gp130含量明显降低(P<0.01),肠组织STAT3、IL-6 mRNA相对表达量与模型组比较明显降低(P<0.05)。结论:蒲公英多糖能够降低溃疡性结肠炎大鼠IL-6水平,下调IL-6/STAT3通路中sIL-6Rα、gp130蛋白表达量,进而下调大鼠肠组织STAT3、IL-6 mRNA的转录水平,缓解结肠组织的炎症状态,保护和修复粘膜组织,起到治疗溃疡性结肠炎的作用。
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    有氧运动与饮食控制对2型糖尿病大鼠肝chemerin及其受体CMKLR1的影响
    林小晶, 杨宏芳, 王晓慧
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 426-430.   DOI: 10.12047/j.cjap.5495.2017.103
    摘要   PDF (1417KB)
    目的:研究4周有氧运动与饮食控制对2型糖尿病(DM)大鼠肝chemerin及其受体趋化因子样受体1(CMKLR1)的影响及其在改善糖脂代谢中的影响。方法:50只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(Con,n=6)和糖尿病造模组(n=44)。采用高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素(STZ)(30 mg/kg)的方法制备2型糖尿病模型大鼠。造模成功的DM大鼠随机分为4组(n=6):糖尿病对照组(DM)、糖尿病运动组(EDM)、改喂普通饲料的糖尿病饮食控制组(NDM)和糖尿病运动+饮食控制组(ENDM)。运动组大鼠进行为期4周中等强度跑台有氧运动,每周运动6 d。采用罗氏血糖仪检测大鼠空腹血糖(FBG),全自动生化分析仪检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白(LDL)水平,real time PCR和Western blot分别检测大鼠肝chemerin、CMKLR1的mRNA和蛋白水平。结果:DM大鼠FBG和血清TC、TG、LDL水平显著升高的同时,肝chemerin和CMKLR1的mRNA和蛋白水平显著增加;4周有氧运动和/或饮食控制显著降低EDM、NDM和ENDM组FBG和血清TC、TG、LDL的同时,显著降低这3组大鼠的肝chemerin蛋白水平,其中ENDM组降低最显著(P<0.01);NDM和ENDM组大鼠的肝CMKLR1蛋白水平升高(P<0.01)。结论:4周有氧运动和/或饮食控制降低2型糖尿病大鼠的肝chemerin蛋白水平、增加CMKLR1蛋白水平,这可能与其改善糖尿病大鼠的糖脂代谢有关。
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    黄酒多酚对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的影响
    潘孙雷, 林辉, 骆杭琪, 高飞丹, 孟立平, 郭艳, 郭航远, 池菊芳
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 431-435.   DOI: 10.12047/j.cjap.5553.2017.104
    摘要   PDF (1103KB)
    目的:探究黄酒多酚对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为空白对照组(Control组)、糖尿病心肌病组(DCM组)、糖尿病心肌病+黄酒多酚组(DCM+YWP组)(n=10)。采用单次腹腔注射65 mg/kg链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病心肌病大鼠模型,对照组采用相同剂量的枸橼酸缓冲液进行单次腹腔注射,DCM+YWP组建模后用18 mg/kg黄酒多酚灌胃。12周后观察大鼠一般情况,用多普勒心超评价心脏结构和功能,用电镜观察心肌组织超微结构,用ELISA法检测心肌组织炎症指标,用氧化应激指标检测试剂盒检测心肌组织氧化应激水平,用Westen blot检测心肌组织凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3(cleaved)的表达水平。结果:与DCM组相比,DCM+YWP组大鼠血糖水平及体重未出现明显变化;心脏超声显示左室舒张末期直径,左室收缩末期直径降低(P<0.05),而左室缩短率、左心室射血分数、E/A比值以及Ea/Aa比值均升高(P<0.05);心肌组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)以及白介素6(IL-6)水平下降(P<0.05);心肌组织氧化应激指标丙二醛(MDA)水平下降、超氧化物歧化酶(SOD)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平上升(P<0.05);心肌组织Bax、Caspase-3(cleaved)蛋白的表达水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白的表达水平升高(P<0.05)。结论:黄酒多酚能改善糖尿病心肌病大鼠的心脏功能,降低心肌组织炎症因子和氧化应激水平,抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡。
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    负重爬梯与有氧跑台运动对糖尿病大鼠学习记忆能力的影响及其机制探讨
    唐量, 亢依婷, 尹博, 孙丽君, 樊岫珊
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 436-440.   DOI: 10.12047/j.cjap.5570.2017.105
    摘要   PDF (1161KB)
    目的:研究负重爬梯与有氧跑台运动对糖尿病大鼠学习记忆能力的改善效果并探索其可能分子机制。方法:40只雄性大鼠,随机分为正常对照组(NC)、糖尿病对照组(DC)、糖尿病负重爬梯组(DL)和糖尿病有氧跑台组(DA),以单次腹腔注射链脲佐菌素构建糖尿病大鼠模型。DL组在晚上进行负重爬梯训练,10次/组×3组/天,每次间歇2 min,6天/周×6周;DA组在同一时间进行20 m/min的跑台训练,30 min/d。于造模成功和运动干预结束后采用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力;第2次水迷宫测试结束后断颈处死大鼠,采用RT-QPCR法检测大鼠海马内脑源性神经营养因子(BDNF)、TRKB、CREB mRNA表达水平。结果:与NC组相比,DC组大鼠海马BDNF、CREB基因表达显著下降,学习记忆能力显著降低。与DC组相比,DL和DA组大鼠海马BDNF、CREB基因表达显著上调,学习能力显著提高;DL大鼠海马TrkB基因显著上调,大鼠空间记忆能力显著改善,而DA组大鼠海马TrkB基因无显著变化,大鼠空间记忆能力无改善,与DA组相比,DL组大鼠海马TRKB、CREB基因显著上调。结论:有氧跑台运动与负重爬梯运动介导BDNF/TrkB/CREB信号通路对糖尿病大鼠的学习能力均有促进作用,而负重爬梯运动对糖尿病大鼠记忆能力的改善优于有氧运动方式。
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    姜黄素对大鼠脊髓损伤后后肢功能恢复的作用机制
    郝琴, 王会伟, 俞茜, 沈娟, 赵琳, 师芳芳, 陈美霓, 杨彦玲
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 441-444.   DOI: 10.12047/j.cjap.5548.2017.106
    摘要   PDF (1199KB)
    目的:观察姜黄素(CUR)对大鼠脊髓损伤后的运动功能的影响,并探讨其对大鼠脊髓损伤的神经保护作用机制,为临床治疗脊髓损伤提供理论和实验依据。方法:采用HI-0400脊髓打击器制备脊髓急性打击损伤动物模型。将105只SD健康清洁级大鼠随机分为3组:假手术组(Sham)、脊髓损伤组(SCI)、姜黄素组(SCI+CUR),在脊髓损伤模型建立后30 min灌胃,以后每天灌胃1次,直到处死为止。SCI+CUR组0.5%羧甲基纤维素钠制备姜黄素(100 mg/kg)灌胃,Sham组与SCI组同等剂量的0.5%羧甲基纤维素钠灌胃。应用BBB评分评估大鼠术后3 d,7 d,14 d,21 d和28 d后肢运动功能恢复的情况;分别在术后12 h、1 d、3 d和7 d天取脊髓组织和血液,通过免疫荧光法检测NF-κB,免疫组化发检测Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白,Elisa法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果:BBB评分中3 d时SCI+CUR组与SCI组时无明显差异,7 d、14 d、21 d和28 d SCI+CUR组得分高于SCI组,其差异具有统计学意义(P<0.05);炎症因子NF-κB的表达于脊髓损伤后12 h出现,1 d达高峰,3 d下降。SCI+CUR组中NF-κB在各个时间点的表达与SCI组出现的时间点相对应,SCI+CUR组少于SCI组;Sham组无明显的Bax及Bcl-2蛋白染色。SCI+CUR组中Caspase-3及Bax染色明显较SCI组减弱,而Bcl-2较SCI组增强。结论:姜黄素可以促进大鼠脊髓损伤后后肢运动功能的恢复,其作用机制是通过抑制NF-κB而阻止炎症发生;并通过抑制Bax、Caspase-3的表达,促进Bcl-2的表达来抑制细胞凋亡,从而促进了大鼠脊髓损伤后的运动功能恢复。
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    Slit 2N与丝素蛋白混合物诱导大鼠海马神经元迁移的体外模型建立
    刚琳, 李一鹏, 卢磊, 杨凯, 孙中磊, 陈旭义, 涂悦
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 445-449.   DOI: 10.12047/j.cjap.5563.2017.107
    摘要   PDF (1427KB)
    目的:利用Slit排斥导向迁移和丝素蛋白,探索建立简便可行、经济实惠、作用持久的神经元导向迁移模型新方法。方法:提取SD新生鼠海马组织,以专用细胞培养片体外培养神经元,分为空白对照组、单纯丝素蛋白、单纯Slit 2N和Slit 2N与丝素蛋白混合物组(以下简称混合物组),分别随机选择不同视野下50个神经元,用显微镜拍照记录胞体坐标及突起状态,除空白对照组外,其他3组均距每个神经元100 μm处添加相应诱导物,共观察30 min,再次记录后,用免疫荧光染色法鉴定细胞性质及其阳性率。结果:单纯Slit 2N组和混合物组均可见突起向浓度低处迁移或弯曲,且长度有所缩短,空白对照组和单纯丝素蛋白组未见明显变化。突起变化的平均持续时间及平均长度差从大到小依次为混合物组、单纯Slit 2N组、单纯丝素蛋白组(P<0.05),单纯丝素蛋白组和空白对照组间无明显变化(P>0.05)。四组神经元MAP-2阳性率均达到90%以上。结论:丝素蛋白对Slit 2N诱导大鼠海马神经元迁移作用无明显影响,可有效减缓Slit 2N扩散速度,使作用时间延长,为治疗中枢神经系统疾病建立三维神经定向修复提供有利的体外实验构建基础。
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    雷公藤内酯醇对多发性骨髓瘤细胞凋亡及组蛋白H3K4甲基化的影响
    徐成波, 廖斌, 沈建箴, 付海英, 林婷
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 450-455.   DOI: 10.12047/j.cjap.5483.2017.108
    摘要   PDF (0KB)
    目的:探讨雷公藤内酯醇(TPL)对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖、凋亡和组蛋白H3K4甲基化的影响。方法:以人多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226为研究对象,在不同浓度(10、20、40、80、160 nmol/L) TPL中共培养不同时间(24 h、48 h、72 h)后,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;Western blot法检测组蛋白H3K4me2、H3K4me3的甲基化状态,实时荧光定量RT-PCR分析组蛋白甲基化酶SMYD3和组蛋白去甲基化酶LSD1的表达水平。结果:TPL对RPMI8226细胞有明显的增殖抑制作用,呈剂量和时间依赖性(P<0.05);TPL对RPMI8226细胞有明显诱导凋亡的作用,并且随着TPL作用浓度的增加,细胞凋亡比例逐渐增加(P<0.05);同时TPL还可以诱导RPMI8226细胞周期阻滞于G2/M期;TPL以浓度依赖性降低组蛋白H3K4me2、H3K4me3的甲基化水平(P<0.05,P<0.01),并抑制SMYD3和上调LSD1的表达(P<0.05)。结论:TPL可抑制RPMI8226细胞增殖、引起细胞周期阻滞于G2/M期,并诱导其凋亡;通过抑制组蛋白甲基化酶SMYD3和增强组蛋白去甲基化酶LSD1的表达,降低组蛋白H3K4me3和H3K4me2的甲基化水平,这可能是TPL诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡和抗肿瘤作用的机制之一。
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    SR 59230A对心衰大鼠心脏MicroRNAs表达的影响
    景佳妮, 李凡璐, 王茜, 宛欣, 赵倩倩, 崔香丽
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 456-460.   DOI: 10.12047/j.cjap.5561.2017.109
    摘要   PDF (1206KB)
    目的:观察β3肾上腺素受体(β3-AR)对心衰大鼠心脏MicroRNAs表达的影响及可能的作用机制。方法:大鼠冠脉左前降支结扎造成心衰模型,假手术大鼠只穿线不结扎。造模成功大鼠再随机分为:心衰组(CHF control group)和心衰+SR 59230A组(CHF+SR group);假手术大鼠也随机分为假手术组(Sham group)和假手术+SR 59230A组(Sham+SR group)。Sham+SR组和CHF+SR组每天两次腹腔注射SR (85 mmol/L,1 ml),连续注射7周。结果:①miScript miRNA PCR Arrays显示,在体阻断β3-AR后,假手术组与心衰组有18种MicroRNAs共同表达下调;经文献比对,与NF-κB相关的MicroRNAs有6种,分别为miR-125b-5p,miR-143-3p,miR-145-5p,miR-26a-5p,miR-30a-5p和miR-320-5p。②大鼠心脏组织切片观察到NF-κB在心衰大鼠心肌细胞核与细胞质中均有分布,而p53在心肌细胞质分布较多,NF-κB和p53表达明显高于假手术组(P<0.05)。阻断β3-AR后,心衰组心脏NF-κB和p53表达显著减少(P<0.05),而假手术组NF-κB和p53表达略增加(P<0.05)。③Western blot结果发现心衰大鼠NF-κB p65表达高于假手术组(P<0.05),给予β3-AR阻断剂后,心衰组心脏NF-κB p65和p53-Phospho-Serine 15表达均下降(P<0.05),而假手术组心脏阻断β3-AR后,NF-κB、p53和p53-Phospho-Serine 15表达均增加(P<0.05)。结论:阻断β3肾上腺素受体有利于缓解心衰大鼠心脏的损伤;β3-AR可引起MicroRNAs表达变化且与NF-κB信号通路有关。
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    不同强度运动结合白藜芦醇对老年肥胖大鼠RBP4的影响
    崔嘉琴, 柏友萍, 苏敏, 宋威巍, 林潺, 吴琳, 张皓月
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 461-465.   DOI: 10.12047/j.cjap.5527.2017.110
    摘要   PDF (958KB)
    目的:探讨不同强度运动结合白藜芦醇对老年肥胖大鼠内脏脂肪组织视黄醇结合蛋白4(RBP4) mRNA蛋白表达及血浆RBP4浓度的影响。方法:选择鼠龄3周的雄性SD大鼠80只,随机分为对照组和实验组:对照组(C)饲喂6.0%脂肪的普通饲料(n=12);实验组分3个阶段饲喂36%~40%高脂饲料(n=68)。建立老年肥胖大鼠模型,选取24只建模成功的肥胖大鼠随机分为4组(n=6):肥胖对照组(CO)、白藜芦醇组(RO)、低强度运动+白藜芦醇组(LRO)、中强度运动+白藜芦醇组(MRO)。LRO组和MRO组的运动强度分别为(12 m/min×15 min)和(15 m/min×15 min),每天运动60 min;补充白藜芦醇各组52.5 mg/kg·d灌胃1次,对照组采用等量的纯净水灌胃,持续干预8周。8周后采血和肾周、睾周、血管及内脏脂肪组织,检测血糖和血浆RBP4浓度、计算胰岛素敏感性(ISI),检测RBP4 mRNA和蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠RBP4 mRNA和蛋白表达、血浆浓度及血糖指标明显升高(P<0.05,P<0.01),ISI明显降低(P<0.05);与模型组比较,RO、LRO组和MRO组大鼠RBP4 mRNA和蛋白表达、血浆浓度及血糖指标明显降低(P<0.05,P<0.01),ISI明显升高(P<0.05);RO、LRO组和MRO组之间比较,MRO组大鼠RBP4 mRNA和蛋白表达、血浆浓度及血糖指标明显降低,ISI明显升高,但无显著差异。结论:不同强度运动结合白藜芦醇能降低老年肥胖大鼠内脏脂肪组织RBP4 mRNA和蛋白表达及血浆RBP4浓度,受运动强度影响较小。
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    葛根素对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的作用
    金鑫, 孙盼盼, 洪云, 虞乐, 李曙
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 466-469.   DOI: 10.12047/j.cjap.5535.2017.111
    摘要   PDF (1138KB)
    目的:观察葛根素对人非小细胞肺癌A549细胞生长的抑制作用及其机制。方法:体外培养人非小细胞肺癌细胞(A549),不同浓度(60 μg/ml,120 μg/ml,240 μg/ml)葛根素处理24 h后;采用CCK-8法观察葛根素对细胞的增值抑制作用;吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双染法及AnnexinⅤ-PI双染流式细胞术检测药物作用前后A549细胞的形态学变化及凋亡状况;Western blot法检测Apelin/APJ蛋白水平的变化。结果:CCK-8法检测结果说明葛根素能抑制A549细胞的增值,具有浓度和时间依赖关系;流式细胞术进一步证实葛根素具有诱导细胞凋亡的作用,与A549细胞组比较,葛根素各处理组Apelin/APJ蛋白水平均有不同程度下调。结论:葛根素可能通过调节Apelin/APJ蛋白的表达诱导A549细胞凋亡。
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    TAK1基因沉默对TNF-a诱导的滑膜细胞IL-6、IL-8表达的影响
    莫选荣, 谢江文, 吕国菊, 柯于平, 罗心静
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 471-475.   DOI: 10.12047/j.cjap.5494.2017.113
    摘要   PDF (1548KB)
    目的:观察转化生长因子β激活激酶1(TAK1)基因沉默对肿瘤坏死因子a (TNF-a)诱导的滑膜细胞中促炎介质白介素-6(IL-6)和白介素-8(IL-8)表达的影响,以探讨TAK1在类风湿关节炎(RA)发病中的作用。方法:采取脂质体转染方法将TAK1特异性的小干扰RNA (siRNA)和阴性对照RNA (scRNA)导入类风湿关节炎的滑膜成纤维细胞株MH7A细胞,然后分别用20 ng/ml TNF-a刺激后,检测细胞内IL-6、IL-8 mRNA的表达和培养上清中IL-6和IL-8分泌情况以及p38、ERK、JNK、p65磷酸化的水平和抑制性蛋白IκBα的变化情况。结果:siRNA-TAK1转染72 h后滑膜细胞中TAK mRNA和蛋白表达的平均抑制率分别为75%和55%。siRNA-TAK1转染下调TNF-a诱导状态下IL-6和IL-8的表达,并能抑制p38、JNK、p65磷酸化和增加IκBα水平。结论:TAK1基因沉默能抑制TNF-a诱导的滑膜细胞IL-6、IL-8表达,可能与其抑制JNK和p38MAPK的活化及NF-κB的活化有关。
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    荷叶水提物对实验性肥胖大鼠脂代谢的影响及机制
    李毛毛, 黄鑫源, 梁乾坤, 李云霞, 剡媛, 田志峰, 邱小青, 张晓文, 宋清, 李红芳
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 476-480.   DOI: 10.12047/j.cjap.5409.2017.114
    摘要   PDF (1432KB)
    目的:探讨荷叶水提物的减肥降脂作用及机制。方法:通过离体脂肪组织灌流实验观察荷叶水提物对正常SD大鼠离体脂肪组织游离脂肪酸(FFA)释放的影响;利用高糖高脂饮食诱导建立实验性肥胖大鼠模型,探讨荷叶水提物给药4周后,大鼠体重和血脂水平的变化,并采用RT-PCR和免疫组化技术对脂肪组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)和瘦素(leptin)表达进行检测。结果:离体实验发现荷叶水提物可明显促进离体脂肪组织FFA的释放。在体实验发现中剂量荷叶(60 mg/kg)与奥利斯他相似,可使实验性肥胖大鼠体重、血脂水平明显下降(P<0.05),使脂肪组织PPAR-γ和瘦素的表达明显下降(P<0.05)。结论:荷叶水提物可通过改善大鼠脂肪组织PPAR-γ和leptin的表达,促进脂肪的动员和分解,降低肥胖大鼠体重和血脂水平,有望研发为减肥药物。
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    研究简报
    苏格木勒-3汤对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥厚后Caspase3/9表达的影响
    王羽, 刘明洁, 付瑶, 郭欣, 于丽君
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 390-392.   DOI: 10.12047/j.cjap.5532.2017.094
    摘要   PDF (1557KB)
    目的:探讨苏格木勒-3汤(SD-3)对异丙肾上腺素(ISO)所致大鼠心肌肥厚的保护作用并探讨其机制。方法:32只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、SD-3治疗组和SD-3对照组(n=8)。模型组和SD-3治疗组皮下注射85 mg/(kg·d) ISO连续2 d致大鼠心肌肥厚模型;造模后,SD-3治疗组和SD-3对照组灌胃给予2 g/kg的SD-3,空白对照组、模型组灌以等体积的蒸馏水,干预14 d。于16 d末,观察各组大鼠心脏外观、心脏指数形态学变化;检测Caspase-3/9的活性和表达情况。结果:与正常对照组相比,模型组心脏变大,缺血,心脏指数升高,病理损伤严重,SD-3汤改善上述现象。进一步发现SD-3汤降低因ISO诱导的Caspase-3/9的活性并下调Caspase-3/9的表达。SD-3组大鼠心脏没有变化,与空白对照组无明显差异。结论:SD-3对ISO诱导的大鼠心肌肥厚具有保护作用,并通过下调Caspase-3/9表达缓解心肌肥厚转为心衰。
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    强化间歇训练对慢性心衰患者心肺耐力及自主神经功能的影响
    王红雨, 岳建兴
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 402-404.   DOI: 10.12047/j.cjap.5487.2017.097
    摘要   PDF (925KB)
    目的:探讨强化间歇训练对慢性心衰患者心肺耐力及自主神经功能的影响。方法:34名稳定期慢性心衰患者随机分成试验组和对照组,每组各17名,两组均采用常规药物治疗,其中试验组同时结合间歇运动训练治疗,训练周期12周,前2周为适应性训练,采用功率自行车和30%~50% HRmax强度进行训练,每周训练3次,每次运动20~30 min;后10周采用强化间歇训练,采用功率自行车和运动靶心率=80%~90% HRmax强度训练,训练时间30~40 min,每周训练3次;采用6 min步行距离和心率变异性指标进行效果评价。结果:与试验前比较,12周治疗后,对照组和试验组6 min步行距离均增加,差异具有统计学意义(P<0.01),反映自主神经功能的时域指标和频域指标均出现增高,差异具有统计学意义(P<0.01);试验后,试验组6 min步行距离、时域指标和频域指标改变幅度大于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:强化间歇训练可以作为慢性心衰患者心肺耐力提高和自主神经功能改善的康复手段,比单一的药物治疗效果更好。
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    跆拳道训练对大学生肌肉适能的影响
    马涛, 杨露露, 李腾飞
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 419-421.   DOI: 10.12047/j.cjap.5503.2017.101
    摘要   PDF (906KB)
    目的:探讨跆拳道训练对提高大学生肌肉适能的重要价值,为跆拳道运动在高校,乃至中小学的普遍开展提供参考。方法:对102名大学生进行每周3次,每次90 min,为期24周的跆拳道训练,所有学生在跆拳道训练前2 d和24周的训练结束后2 d,检测握力、立定跳远、仰卧起坐、蹲起,比较跆拳道训练前后肌肉最大力量、爆发力以及肌肉耐力的变化。结果:24周的跆拳道训练干预后,大学生的握力、立定跳远、仰卧起坐、蹲起等指标都较训练前有明显改善(P<0.05)。结论:跆拳道训练对改善大学生肌肉最大力量、爆发力以及肌肉耐力等肌肉适能具有一定的作用,跆拳道运动可作为高校大学生健康适能的一种运动方式。
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    小剂量肝素对小鼠淹溺肺损伤SOD、MPO活性和MDA水平的影响
    杜斌, 朱丹, 温媛婷, 陈俊良, 唐筛娣, 孙洁芸, 陈炜, 庞庆丰
    中国应用生理学杂志. 2017, 33 (5): 469-470.   DOI: 10.12047/j.cjap.5510.2017.112
    摘要   PDF (1036KB)
    目的:探讨小剂量肝素对淹溺诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用。方法:6 0只小鼠随机分为正常组、溺亡组和小剂量肝素组,每组各20只。肝素组在游泳前30 min腹腔注射肝素0.1 U/g。将小鼠放入内壁光滑的离心管内置入水中让其自由游泳建立小鼠淡水淹溺肺损伤模型。正常组小鼠采用脊椎脱臼法处死,溺亡组和小剂量肝素组溺亡小鼠溺亡9 min后,取肺组织。称重肺组织计算肺指数及肺湿/干重比;HE染色观察小鼠肺组织的病理变化;取肺组织检测肺组织丙二醛(MDA)、肺组织髓过氧化物酶(MPO),超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:与正常组相比,溺亡组小鼠肺指数增加,湿干重比(W/D)比值增高;肺组织病理形态学炎症明显加重;肺组织匀浆SOD活性明显降低,MDA含量、MPO活性升高(P<0.05,P<0.01)。与溺亡组相比,肝素组小鼠肺指数降低,湿干重比(W/D)比值降低;肺组织病理形态学炎症明显减轻;肺组织匀浆SOD活性明显升高,MDA含量、MPO活性降低(P<0.05,P <0.01)。结论:小剂量肝素可以发挥抗炎和抗氧化作用,减轻淹溺诱导的小鼠急性肺损伤。
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  2019-03-15
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