于生财, 倪向敏, 张贵明, 白倩, 梁馨予, 王建
营养学报. 2024, 46(2): 163-170.
目的 观察雌马酚(equol, Eq)干预对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的L6细胞线粒体稳态紊乱的影响,并探讨其相关机制。方法 体外培养L6细胞,将细胞分为对照组、模型(PA)组、PA+Eq组、PA+Eq+SR18292、PA+ Eq+Phttp组、PA+Eq+RM02812组。检测作用不同时间点各组细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、细胞活力、葡萄糖摄取能力;以及干预24 h各组线粒体膜电位、自噬强度变化;荧光探针标记线粒体,观察各组线粒体形态变化;透射电镜观察各组线粒体形态结构和自噬小体;检测各组同源性磷酸酶张力蛋白诱导激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)、帕金森蛋白(Parkin)、SQSTM1蛋白(sequestosome l,P62)、微管相关蛋白1Ⅰ轻链3 ( microtubule-associated protein 1Ⅰlight chain 3, LC3Ⅰ)、微管相关蛋白1Ⅱ轻链3( microtubule-associated protein 1Ⅱlight chain 3, LC3Ⅱ)、线粒体融合蛋白2(mitochondrial fusion protein 2,MFN2)、动力相关蛋白1(dynaminrelatedprotein 1,DRP1)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor γ co-activator-1α,PGC-1α)表达。结果 0.25 mmol/L棕榈酸处理细胞6 h后活性氧水平显著增高(P<0.05),细胞活力下降(P<0.05),葡萄糖摄取量降低 (P<0.05);与模型组相比,雌马酚能明显降低活性氧水平(P<0.05),提高细胞活力和葡萄糖消耗;棕榈酸干预24 h后,线粒体膜电位明显下降(P<0.05),自噬水平降低(P<0.05);与模型组相比,雌马酚能改善线粒体膜电位下降,促进线粒体融合,减少裂变(P<0.05); PINK1、Parkin、P62、LC3Ⅱ、MFN2和PGC-1α的表达明显增高(P<0.05),DRP1表达降低(P<0.05)结论 雌马酚能够改善棕榈酸诱导的L6细胞线粒体稳态紊乱,减轻线粒体裂变,其部分机制可能与雌马酚促进线粒体自噬有关。